無塵室沉降菌監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)操作程序

無塵室沉降菌監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)操作程序

1目的：準(zhǔn)確監(jiān)測潔凈區(qū)沉降菌落數(shù)，確保生產(chǎn)及檢驗區(qū)域空氣中的微生物數(shù)量符合要求，保證產(chǎn)品質(zhì)量。

2范圍：適用于本公司潔凈區(qū)。

3責(zé)任者：生測組沉降菌監(jiān)測人員按此標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。

4變更原因：進(jìn)一步完善操作程序，使之更加規(guī)范，合理。

5內(nèi)容：

5.1采樣器皿的清洗與消毒

5.1.1先用清水將培養(yǎng)皿沖洗數(shù)次，再用適宜的毛刷,洗滌液反復(fù)刷洗再用飲用水沖洗至無氣泡，最后用純化水洗滌晾干。

5.1.2將培養(yǎng)皿放入不銹鋼培養(yǎng)皿筒里再放入電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱250℃干熱滅菌一小時。 

5.2儀器與設(shè)備

5.2.1超凈臺，電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱、恒溫培養(yǎng)箱、不銹鋼培養(yǎng)皿筒 ， 培養(yǎng)皿，酒精燈。

5.2.2培養(yǎng)基：營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基

5.3培養(yǎng)基平皿的制備

5.3.1將培養(yǎng)基加熱熔化，冷至45℃時，在無菌條件下操作，將培養(yǎng)基注入培養(yǎng)皿，每皿約15ml～18ml。

5.3.2待瓊脂凝固后，將培養(yǎng)基平皿倒置于30～35℃和23～28.℃培養(yǎng)箱中分別培養(yǎng)48小時和72小時確保培養(yǎng)基平皿上無菌時方可使用，將制備好的培養(yǎng)基平皿在4～8℃的環(huán)境中存放。

 

5.4采樣方法：將已制備好的培養(yǎng)皿放置在預(yù)先確定的取樣點，打開培養(yǎng)皿蓋使培養(yǎng)基表面暴露規(guī)定時間，再將培養(yǎng)皿蓋上蓋。

5.5培養(yǎng)

5.5.1全部采樣結(jié)束，將培養(yǎng)皿倒置`

5.5.2分別放入30～35℃, 23～28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時，72小時。

5.5.3每批培養(yǎng)基，做對照培養(yǎng)，每批培養(yǎng)皿的個數(shù)不得少于兩個。

5.6采樣點數(shù)目及最少培養(yǎng)皿數(shù)

5.6.1采樣點數(shù)目

面積(m2)	潔凈度級別
	100	10.000	100.000
<10	2-3	2	2
≥10-<20	4	2	2
≥20-<40	8	2	2
≥40-<100	16	4	2
≥100-<200	40	10	3
注：表中的面積，對于單向流無塵室，指的是送風(fēng)面積，對于非單向流無塵室指的是房間面積

5.6.2每十平方米所需培養(yǎng)皿數(shù)

潔凈度級別	所需培養(yǎng)皿數(shù)（個）
100級	每兩平方米放3個，每十平方米放14個。
10.000級	2
100.000級	2
300.000級	2

 

5.6.3采樣點的布置

5.6.3.1工作區(qū)測試點位置離地面0.8～1.5m（略高于工作面）。

5.6.3.2可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動范圍處增加測點，采樣點的布置均勻，避免采樣點某局部區(qū)域過于集中某局部區(qū)域過于稀疏。

5.7計算結(jié)果：用計數(shù)方法得出每個培養(yǎng)皿的菌落數(shù)。每個測點的沉降菌的平均菌落數(shù)用公式計算。          

     平均菌落數(shù)M=（M1+M2+M3+…+Mn）/   n

式中，M——平均菌落數(shù)；

      M1——1號培養(yǎng)皿菌落數(shù)；

      M2——2號培養(yǎng)皿菌落數(shù)；

      Mn——n號培養(yǎng)皿菌落數(shù)；

      N——培養(yǎng)皿總數(shù)；

5.8生產(chǎn)車間檢測

5.8.1采樣狀態(tài)和時間

5.8.1.1靜態(tài)：30分鐘；動態(tài)：生產(chǎn)過程全天檢測，每4小時換一次培養(yǎng)皿。

5.9 監(jiān)測頻次：

5.9.1生產(chǎn)車間在產(chǎn)品生產(chǎn)期間，根據(jù)潔凈區(qū)潔凈度等級分別進(jìn)行監(jiān)測。

5.9.1.1百級及萬級區(qū)，各車間每天應(yīng)監(jiān)測，但采樣量及采樣數(shù)目可以減少

5.9.1.2表面污染及人體細(xì)菌測試在無菌藥品生產(chǎn)期間每天應(yīng)進(jìn)行。

5.9.1.3十萬級區(qū)各車間應(yīng)每周監(jiān)測一次。

5.9.1.4三十萬級區(qū)各車間應(yīng)每兩周監(jiān)測一次。

5.10質(zhì)量檢驗部應(yīng)對各車間定期抽檢：靜態(tài)30分鐘；動態(tài)4小時。

潔凈度級別	10，000級及100級	100，000級	300，000級
測試狀態(tài)	動態(tài)	動態(tài)	動態(tài)
測試頻次	1次/周	1次/月	1次/季

5.11車間在停產(chǎn)后開產(chǎn)前的監(jiān)測按請驗單及時進(jìn)行。

 

 

5.12潔凈度級別及標(biāo)準(zhǔn)

潔凈度   狀態(tài)及標(biāo)準(zhǔn)	100級	10000級	100000級	300000級
靜態(tài)（個/皿）	≤1	≤3	≤10	≤15
動態(tài)（個/皿）	≤1	≤10	≤30	≤50

注：霉菌不得檢出

5.1.3如果測試結(jié)果全部符合評定標(biāo)準(zhǔn)，即開合格報告。如果有個別房間不符合標(biāo)準(zhǔn)，將開不合格報告，要求立即采取措施，直至合格。